皖南医学院学报

2008, No.115(02) 94-97

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不同RT-PCR方法学的探讨
Detecting micro RNA specimen by RT-PCR

李铁臣;曹宏伟;张艳;江潇;汪萌芽;

摘要(Abstract):

目的:探讨微量RNA标本的RT-PCR方法。方法:采集13例新生大鼠脊髓标本,提取RNA,分别稀释至1μg/μl、1ng/μl和1 pg/μl,分别以两步法RT-PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒,扩增β-actin基因,经1.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射仪下观察分析。结果:浓度为1μg/μl和1ng/μl的标本,三种方法均出现了目标带,而浓度为1 pg/μl的标本,两步法RT- PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒的阳性率分别为85%、77%和100%。结论:一步法敏感性高于两步法,微量RNA标本以采用Qiagen公司的一步法试剂盒进行RT-PCR实验为好。

关键词(KeyWords): 微量RNA;两步法RT-PCR;一步法RT-PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30270366)

作者(Author): 李铁臣;曹宏伟;张艳;江潇;汪萌芽;

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参考文献(References):

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